木板油畫199×122 cm1625年，路易十三收藏於楓丹白露宮後被盧浮宮收藏
達·芬奇是一位通曉藝術與科學的全才，他先後輾轉於佛羅倫薩、米蘭、羅馬等城市，最後在法國國王弗朗索瓦一世的宮廷內度過了自己職業生涯的最後階段。定居米蘭期間，他曾創作過兩幅祭壇畫《巖間聖母》，第一幅就是盧浮宮的這幅，第二幅現藏於倫敦國家美術館。在這幅表現「聖母無染原罪」主題的名作中，達·芬奇描繪了置身於岩石嶙峋的山谷中的聖母、聖嬰、小施洗約翰、大天使烏列爾的群像。聖母的容貌隱含著象徵意義，是達·芬奇根據《舊約聖經·詩歌智慧書》第五卷《雅歌》中對少女的描寫而刻畫的，該形象常見於聖母題材的繪畫作品，深受主張「聖母無染原罪」學說的教會人士的喜愛。主要光源與次要光源的巧妙設計最能體現達·芬奇在表現形式和畫面結構上的創新，投射向畫中人物的光芒在手勢與目光的引導下，照亮了由各異的姿態與情感交織而成的富於動態感的群像。在以暗色為基調的畫面中，幽暗的背景清晰襯托出散發著耀眼光彩的人物形象，使每一個人物都呈現出立體而神聖的奇特效果。